يمكن استخلاص ESC-MSCs باستخدام منصة ثلاثية الأبعاد (3D) عبر طرق مختلفة و أثناء صيانة وتوسيع الخلايا الجذعية متعددة القدرات، يمكن إجراء طريقة ثقافة التعليق دون أي تغييرات في تعدد القدرات أو تشوهات الكروموسومات.
في عام 2017، جيانغ وآخرون. أجرى دراسة مقارنة حول معدل بقاء الخلايا الجذعية (hESCs وESC-MSCs وhBM-MSCs) المستزرعة في منصة استنبات ثلاثية الأبعاد (استزراع الأجسام الشبه الكروية) أو منصة ثنائية الأبعاد (أحادية الطبقة) في ظل الظروف المحيطة.

أظهرت الخلايا الجذعية المستزرعة بنظام ثلاثي الأبعاد معدل بقاء أعلى في ظل ظروف انخفاض الحرارة (من 10 درجة مئوية إلى 37 درجة مئوية) لفترة حضانة طويلة (لمدة 7-9 أيام)، في حين تم اكتشاف موت الخلايا الملحوظ في الخلايا المستزرعة في تجربة ثنائية الأبعاد.
بالإضافة إلى ذلك، تم عرض البقاء المطول لـ hESC لمدة أربعة أيام في ظل الظروف المحيطة. تجدر الإشارة إلى أن إعادة طلاء الأجسام الشبه الكروية المعرضة للظروف المحيطة على منصة أحادية الطبقة أظهرت ارتباطات فعالة وتكوين مستعمرة للخلايا المستردة عند تربيتها في الظروف العادية. تُعزى أوقات البقاء الأعلى والمطولة للخلايا الجذعية الكروية على ثقافة أحادي الطبقة إلى انخفاض معدل التكاثر والتمثيل الغذائي
MSCs متباينة باستخدام منصة ثلاثية الأبعاد من أجل التغلب على أوجه القصور في الأساليب القائمة على النظام الأساسي ثنائي الأبعاد لاشتقاق PSC-MSC، مثل التكلفة العالية والعمالة واستهلاك الوقت وعدم الكفاءة.
في هذه الطريقة، تم إعداد hESCsp المتجانس وفقًا للبروتوكولات التي تم الإبلاغ عنها سابقًا بواسطة وأوتسوجي وآخرون لهذا الغرض، تم فصل مستعمرات hESCs مع dispase، وغسلها بـ PBS، ثم مرت عبر مصفاة (بقطر مسام 50 ميكرومتر) لإنتاج مجموعات من الخلايا ذات الأحجام الزوجية في النهاية (حوالي 50 ميكرومتر) (الشكل 3A). تم طلاء هذه المجموعات على طبق بتري في وسط mTeSR1 مُكمل بمثبط بروتين كيناز (ROCK) المرتبط بـ Rho، والمحتوي على ملفوف، Y-27632، لمنع موت الخلايا المبرمج. في اليوم الثاني، تعرضت الأجسام الشبه الكروية المستنبتة للتمايز إلى خلايا تشبه الأرومة الغاذية باستخدام BMP4 وA83-01،وفي اليوم الثالث، تم اكتشاف زيادة كبيرة في مستوى التعبير عن الجينات المرتبطة بالأرومة المغذية. في اليوم الخامس، تم تبادل وسيلة التمايز مع مستنبت MSC.




